Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞
Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞核心產(chǎn)品為從新鮮肺組織中分離純化的原代細(xì)胞或永生化細(xì)胞株,可提供人源、鼠源等多種來源,配套提供細(xì)胞培養(yǎng)說明書、細(xì)胞凍存液、復(fù)蘇液及質(zhì)量檢測報告(含細(xì)胞純度、活性檢測、支原體檢測等),同時提供細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)支持及定制化分離培養(yǎng)服務(wù)。該細(xì)胞主要從支氣管肺泡灌洗液或手術(shù)切除的肺組織中分離純化,經(jīng)yi酶消化、密度梯度離心等步驟獲得,通過特異性標(biāo)志物(如SP-C、TTF-1)鑒定,確保細(xì)胞純度≥98%,無支原體、細(xì)菌、真菌污染,細(xì)胞活性≥90%。該細(xì)胞適配常規(guī)原代細(xì)胞培養(yǎng)條件,可穩(wěn)定傳代,生物學(xué)特性穩(wěn)定,保留其固有生理功能(如表面活性物質(zhì)分泌、增殖分化能力),廣泛應(yīng)用于肺部疾病(如肺纖維化、肺炎)發(fā)病機(jī)制研究、肺表面活性物質(zhì)合成調(diào)控研究、肺損傷修復(fù)機(jī)制研究、呼吸道病毒感染機(jī)制研究及相關(guān)藥物篩選等科研場景,為呼吸病學(xué)、再生醫(yī)學(xué)、分子生物學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域的科研探索、藥物研發(fā)提供核心細(xì)胞模型,適配科研院所、生物醫(yī)藥企業(yè)、高校實(shí)驗(yàn)室及各級醫(yī)院呼吸內(nèi)科科研部門。
分離與培養(yǎng)原理
該細(xì)胞的分離與培養(yǎng)核心基于肺組織消化分離技術(shù),結(jié)合其細(xì)胞形態(tài)及生物學(xué)特性,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的精準(zhǔn)分離與體外穩(wěn)定培養(yǎng),具體核心步驟分為分離和培養(yǎng)兩部分:一是細(xì)胞分離原理,選取新鮮肺組織(人或動物),去除血管、支氣管等結(jié)締組織后,剪碎至勻漿狀態(tài),加入yi酶等消化酶進(jìn)行消化,使肺組織分散為單細(xì)胞懸液,通過密度梯度離心去除雜細(xì)胞(如紅細(xì)胞、成纖維細(xì)胞),再利用該細(xì)胞特異性標(biāo)志物(SP-C)進(jìn)行篩選,獲得高純度該細(xì)胞,確保細(xì)胞無雜細(xì)胞污染;二是細(xì)胞培養(yǎng)原理,將分離獲得的該細(xì)胞接種于鋪有基質(zhì)膠的培養(yǎng)瓶中,使用含胎牛血清、上皮細(xì)胞生長因子的專用培養(yǎng)基,置于37℃、5% CO?、飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),培養(yǎng)基可維持細(xì)胞的生長活力,同時保留其分泌表面活性物質(zhì)、增殖分化為Ⅰ型肺泡上皮細(xì)胞的固有功能,定期更換培養(yǎng)基,確保細(xì)胞正常生長,避免細(xì)胞分化或凋亡。此外,所有分離培養(yǎng)的該細(xì)胞均需經(jīng)過細(xì)胞活性檢測、純度鑒定及污染檢測,確保細(xì)胞的穩(wěn)定性和可靠性,為后續(xù)科研實(shí)驗(yàn)提供優(yōu)質(zhì)細(xì)胞模型,同時可通過優(yōu)化培養(yǎng)體系,模擬體內(nèi)肺泡微環(huán)境,提升細(xì)胞體外培養(yǎng)的穩(wěn)定性。
產(chǎn)品特點(diǎn)
該細(xì)胞以“純度高、活性強(qiáng)、功能完整、適配性廣"為核心,貼合肺部疾病研究及再生醫(yī)學(xué)的實(shí)際科研需求,核心特點(diǎn)突出,匹配科研實(shí)驗(yàn)對細(xì)胞模型的核心訴求。一是純度高、無污染,細(xì)胞純度≥98%,經(jīng)特異性標(biāo)志物鑒定及嚴(yán)格污染檢測,無支原體、細(xì)菌、真菌及雜細(xì)胞污染,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,避免雜細(xì)胞及污染對實(shí)驗(yàn)的干擾;二是細(xì)胞活性強(qiáng),分離過程中優(yōu)化消化條件,減少細(xì)胞損傷,細(xì)胞活性≥90%,復(fù)蘇成活率高,體外培養(yǎng)過程中可穩(wěn)定增殖,保留其固有生理功能(分泌表面活性物質(zhì)、分化為Ⅰ型肺泡上皮細(xì)胞);三是功能完整性好,可穩(wěn)定分泌肺表面活性物質(zhì),降低肺泡表面張力,維持肺泡穩(wěn)定性,同時具備自我增殖及分化為Ⅰ型肺泡上皮細(xì)胞的能力,可模擬體內(nèi)肺損傷修復(fù)過程,適配肺損傷修復(fù)機(jī)制研究;四是適配性強(qiáng),可適配體外常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)、MTT增殖實(shí)驗(yàn)、Western blotting檢測、免疫熒光染色、病毒感染實(shí)驗(yàn)等多種實(shí)驗(yàn)場景,同時可用于裸鼠肺內(nèi)移植體內(nèi)實(shí)驗(yàn),助力體內(nèi)外協(xié)同研究,尤其適配xin冠病du等呼吸道病毒感染機(jī)制研究;五是操作便捷,提供完整的細(xì)胞復(fù)蘇、培養(yǎng)、凍存說明書,無需復(fù)雜實(shí)驗(yàn)設(shè)備,常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)條件即可滿足生長需求,適配各類實(shí)驗(yàn)室操作,同時針對肺組織分離、細(xì)胞傳代提供專屬技術(shù)指導(dǎo);六是定制化服務(wù)完善,可根據(jù)科研需求,提供不同來源(人源、鼠源)、不同純度的該細(xì)胞,同時提供細(xì)胞分離培養(yǎng)、功能驗(yàn)證等配套服務(wù),滿足不同科研場景的個性化需求。
四、適用實(shí)驗(yàn)場景
本該細(xì)胞專為肺部相關(guān)科研實(shí)驗(yàn)設(shè)計,適配多種體外及體內(nèi)實(shí)驗(yàn)場景,核心應(yīng)用包括:一是肺部疾病發(fā)病機(jī)制研究,探究該細(xì)胞功能異常(如表面活性物質(zhì)分泌不足、增殖分化障礙)與新生兒呼吸窘迫綜合征、特發(fā)性肺纖維化、慢性阻塞性肺疾病等疾病的關(guān)聯(lián),明確疾病發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制,同時可用于研究Notch等信號通路對該細(xì)胞增殖分化的調(diào)控作用;二是肺損傷修復(fù)機(jī)制研究,利用該細(xì)胞可分化為Ⅰ型肺泡上皮細(xì)胞的特性,研究肺損傷后細(xì)胞再生、修復(fù)的分子路徑,為肺損傷相關(guān)疾病的治療提供理論依據(jù);三是呼吸道病毒感染機(jī)制研究,可用于SARS-CoV-2等呼吸道病毒的感染實(shí)驗(yàn),探究病毒對該細(xì)胞的感染特性及損傷機(jī)制,為抗病du藥物研發(fā)提供模型支撐;四是藥物篩選與藥效評估,將該細(xì)胞用于肺部疾病相關(guān)藥物(如肺表面活性物質(zhì)替代藥物、抗肺纖維化藥物、抗病du藥物)的篩選,評估藥物對細(xì)胞功能、增殖及凋亡的影響,為藥物研發(fā)提供可靠的篩選模型;五是分子機(jī)制驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),可用于Western blotting、Real-time PCR、免疫熒光染色、流式細(xì)胞術(shù)等實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證與該細(xì)胞功能相關(guān)的基因(如SP-C)及信號通路的調(diào)控機(jī)制,為肺部疾病發(fā)病機(jī)制研究提供分子層面的數(shù)據(jù)支撐;六是再生醫(yī)學(xué)研究,可作為肺再生研究的核心細(xì)胞,用于肺泡類器官構(gòu)建、iPS細(xì)胞誘導(dǎo)分化相關(guān)實(shí)驗(yàn),助力人工肺構(gòu)建及肺再生治療研究。該細(xì)胞適配科研院所、生物醫(yī)藥企業(yè)、高校實(shí)驗(yàn)室及各級醫(yī)院呼吸內(nèi)科科研部門,助力肺部相關(guān)科研實(shí)驗(yàn)的順利開展。
備注:(具體細(xì)胞分離、培養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)操作方法請參考產(chǎn)品說明書)
儲存與注意事項(xiàng)
儲存方面,該細(xì)胞凍存狀態(tài)下需置于-80℃超低溫冰箱或液氮中保存,有效期為12個月,凍存時需使用含5-10%DMSO的配套凍存液,采用梯度降溫法凍存,避免細(xì)胞損傷;復(fù)蘇時需快速解凍(37℃水浴1-2分鐘),解凍后立即用70%酒精消毒凍存管,避免進(jìn)水污染,復(fù)蘇后需立即接種至鋪有基質(zhì)膠的培養(yǎng)瓶,置于37℃、5% CO?、飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),復(fù)蘇后24小時內(nèi)避免更換培養(yǎng)基,確保細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境;常規(guī)培養(yǎng)狀態(tài)下,細(xì)胞需置于37℃、5% CO?培養(yǎng)箱中,使用含10%胎牛血清的上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng),定期更換培養(yǎng)基(每2-3天一次),確保細(xì)胞正常生長,避免細(xì)胞分化。注意事項(xiàng)包括:產(chǎn)品僅供科研使用,不用于臨床治療診斷;細(xì)胞復(fù)蘇時需快速解凍,避免反復(fù)凍融,解凍后及時接種,防止細(xì)胞活力下降,凍存管取出時需注意防護(hù),避免凍傷;培養(yǎng)過程中需嚴(yán)格遵循無菌操作原則,禁止共用培養(yǎng)耗材,避免細(xì)胞污染,若發(fā)生污染切勿進(jìn)行半量換液;細(xì)胞傳代時需控制消化時間,避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞損傷,傳代時需結(jié)合細(xì)胞生長密度,確保細(xì)胞生長密度適宜;檢測過程中(如Western blotting、免疫熒光染色),需嚴(yán)格遵循實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范,確保細(xì)胞功能及分子檢測結(jié)果準(zhǔn)確;過期細(xì)胞及污染細(xì)胞嚴(yán)禁使用,詳細(xì)安全信息請參照產(chǎn)品SDS文件;運(yùn)輸過程中需采用干冰運(yùn)輸,避免高溫、劇烈震蕩,確保細(xì)胞活力,運(yùn)輸后需及時復(fù)蘇或轉(zhuǎn)移至對應(yīng)儲存環(huán)境。
訂購信息
如需獲取產(chǎn)品詳細(xì)資料、批次質(zhì)檢報告或報價方案,歡迎聯(lián)系上海拜力生物科技有限公司獲取技術(shù)支持與商務(wù)服務(wù)。
以上信息僅供參考,具體請已產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)。