Burkitts人淋巴瘤細(xì)胞系
Burkitts人淋巴瘤細(xì)胞系核心產(chǎn)品為從Burkitt淋巴瘤患者新鮮腫瘤組織中分離、永生化構(gòu)建的穩(wěn)定細(xì)胞株,可提供不同亞型(如EB病毒陽(yáng)性、EB病毒陰性)的細(xì)胞系,配套提供細(xì)胞培養(yǎng)說(shuō)明書、細(xì)胞凍存液、復(fù)蘇液及質(zhì)量檢測(cè)報(bào)告(含細(xì)胞純度、c-Myc基因表達(dá)檢測(cè)、支原體檢測(cè)、EB病毒感染狀態(tài)鑒定等),同時(shí)提供細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)支持及定制化實(shí)驗(yàn)服務(wù)。該細(xì)胞采用密度梯度離心、免疫磁珠分選等成熟分離技術(shù),從腫瘤組織中去除正常淋巴細(xì)胞、紅細(xì)胞等雜細(xì)胞,通過(guò)淋巴瘤特異性標(biāo)志物(如CD19、CD20、CD22)及c-Myc基因表達(dá)鑒定,確保細(xì)胞純度≥98%,無(wú)支原體、細(xì)菌、真菌污染,細(xì)胞活性≥90%。該細(xì)胞適配常規(guī)懸浮細(xì)胞培養(yǎng)條件,可穩(wěn)定傳代,生物學(xué)特性穩(wěn)定,保留其惡性增殖、c-Myc基因異常表達(dá)及EB病毒感染相關(guān)特性(EB陽(yáng)性亞型),廣泛應(yīng)用于Burkitt淋巴瘤發(fā)病機(jī)制研究、c-Myc基因功能驗(yàn)證、腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移研究、靶向藥物篩選及免yi治療相關(guān)實(shí)驗(yàn)等科研場(chǎng)景,為腫瘤學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域的科研探索、藥物研發(fā)提供核心細(xì)胞模型,適配科研院所、生物醫(yī)藥企業(yè)、高校實(shí)驗(yàn)室及各級(jí)醫(yī)院腫瘤科、血液科科研部門。
分離與培養(yǎng)原理
該細(xì)胞的分離與培養(yǎng)核心基于腫瘤組織消化分離及永生化技術(shù),結(jié)合Burkitts人淋巴瘤細(xì)胞懸浮生長(zhǎng)、惡性增殖的生物學(xué)特性,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的精準(zhǔn)分離與體外穩(wěn)定培養(yǎng),具體核心步驟分為分離和培養(yǎng)兩部分:一是細(xì)胞分離原理,選取Burkitt淋巴瘤患者新鮮腫瘤組織,無(wú)菌操作下剪碎至勻漿狀態(tài),加入膠原酶、yi蛋白酶混合消化液,37℃水浴消化20-30分鐘,終止消化后用PBS漂洗2-3次,800r/min離心5分鐘棄去上清液,通過(guò)密度梯度離心(Percoll梯度)分離獲得單個(gè)核細(xì)胞,再利用免疫磁珠分選技術(shù)(針對(duì)CD19、CD20標(biāo)志物)篩選出純的淋巴瘤細(xì)胞,去除雜細(xì)胞污染,獲得高純度該細(xì)胞;二是細(xì)胞培養(yǎng)原理,將分離獲得的該細(xì)胞接種于培養(yǎng)瓶中,使用含10%-15%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基,添加青mei素、鏈mei素雙抗,置于37℃、5% CO?、飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),培養(yǎng)基可維持細(xì)胞的惡性增殖活力,同時(shí)保留其c-Myc基因異常表達(dá)及EB病毒感染特性(EB陽(yáng)性亞型),定期更換培養(yǎng)基(每1-2天一次),待細(xì)胞密度達(dá)到1×10?-1×10? cells/mL時(shí)進(jìn)行傳代,確保細(xì)胞正常生長(zhǎng),避免細(xì)胞密度過(guò)高導(dǎo)致凋亡。此外,所有分離培養(yǎng)的該細(xì)胞均需經(jīng)過(guò)細(xì)胞活性檢測(cè)、純度鑒定、c-Myc基因檢測(cè)及污染檢測(cè),確保細(xì)胞的穩(wěn)定性和可靠性,為后續(xù)科研實(shí)驗(yàn)提供優(yōu)質(zhì)細(xì)胞模型,同時(shí)可通過(guò)優(yōu)化培養(yǎng)體系,模擬體內(nèi)淋巴瘤微環(huán)境,提升細(xì)胞體外培養(yǎng)的穩(wěn)定性。
產(chǎn)品特點(diǎn)
該細(xì)胞以“純度高、活性強(qiáng)、特征典型、適配性廣"為核心,貼合Burkitt淋巴瘤相關(guān)研究的實(shí)際科研需求,核心特點(diǎn)突出,匹配科研實(shí)驗(yàn)對(duì)細(xì)胞模型的核心訴求。一是病理特征典型,保留Burkitt淋巴瘤的核心生物學(xué)特征,存在c-Myc基因異常擴(kuò)增及易位,部分亞型攜帶EB病毒,可精準(zhǔn)模擬臨床淋巴瘤的病理狀態(tài),助力發(fā)病機(jī)制研究;二是細(xì)胞純度高、無(wú)污染,細(xì)胞純度≥98%,經(jīng)淋巴瘤特異性標(biāo)志物鑒定及嚴(yán)格污染檢測(cè),無(wú)支原體、細(xì)菌、真菌及雜細(xì)胞污染,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性;三是生物學(xué)特性穩(wěn)定,細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好,懸浮增殖迅速,可穩(wěn)定傳代30代以上,傳代過(guò)程中c-Myc基因異常表達(dá)特性不丟失,惡性表型穩(wěn)定,符合科研實(shí)驗(yàn)對(duì)數(shù)據(jù)可重復(fù)性的核心要求;四是功能關(guān)聯(lián)性強(qiáng),具備惡性淋巴瘤細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移潛能,可用于研究c-Myc基因?qū)δ[瘤增殖、凋亡的調(diào)控機(jī)制,以及EB病毒與淋巴瘤發(fā)生的關(guān)聯(lián),適配多維度科研需求;五是適配性強(qiáng),可適配體外常規(guī)懸浮細(xì)胞培養(yǎng)、MTT增殖實(shí)驗(yàn)、Transwell侵襲/遷移實(shí)驗(yàn)、Western blotting檢測(cè)、免疫熒光染色、基因轉(zhuǎn)染、流式細(xì)胞術(shù)等多種實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景,同時(shí)可用于裸鼠異種移植體內(nèi)實(shí)驗(yàn),助力體內(nèi)外協(xié)同研究;六是操作便捷,提供完整的細(xì)胞復(fù)蘇、培養(yǎng)、凍存說(shuō)明書,細(xì)胞復(fù)蘇成活率高(≥90%),無(wú)需復(fù)雜實(shí)驗(yàn)設(shè)備,常規(guī)懸浮細(xì)胞培養(yǎng)條件即可滿足生長(zhǎng)需求,適配各類實(shí)驗(yàn)室操作,同時(shí)提供基因表達(dá)驗(yàn)證、細(xì)胞培養(yǎng)等專屬技術(shù)指導(dǎo)。
適用實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景
該細(xì)胞專為Burkitt淋巴瘤及相關(guān)腫瘤科研實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),適配多種體外及體內(nèi)實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景,核心應(yīng)用包括:一是淋巴瘤發(fā)病機(jī)制研究,探究該細(xì)胞中c-Myc基因異常擴(kuò)增、易位及EB病毒感染對(duì)淋巴瘤發(fā)生發(fā)展的調(diào)控機(jī)制,分析相關(guān)信號(hào)通路(如PI3K/Akt、NF-κB)的作用,為淋巴瘤發(fā)病機(jī)制研究提供支撐;二是c-Myc基因功能研究,通過(guò)該細(xì)胞開展c-Myc基因沉默、過(guò)表達(dá)實(shí)驗(yàn),探究其對(duì)細(xì)胞增殖、凋亡、侵襲、轉(zhuǎn)移的影響,明確其在惡性淋巴瘤中的促癌作用;三是腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移研究,利用該細(xì)胞的侵襲性特性,開展Transwell、細(xì)胞劃痕等實(shí)驗(yàn),探究淋巴瘤侵襲轉(zhuǎn)移的分子路徑,為抗轉(zhuǎn)移治療研究提供依據(jù);四是藥物篩選與藥效評(píng)估,將該細(xì)胞用于淋巴瘤靶向藥物(如c-Myc抑制劑、CD20單克隆抗體)、hua療藥物的篩選,評(píng)估藥物對(duì)細(xì)胞增殖、凋亡的抑制效果,為淋巴瘤藥物研發(fā)提供可靠的篩選模型;五是免yi治療相關(guān)研究,可用于CAR-T細(xì)胞治療、免疫檢查點(diǎn)抑制劑相關(guān)實(shí)驗(yàn),評(píng)估免yi治療對(duì)淋巴瘤細(xì)胞的殺傷效果,助力免yi治療技術(shù)研發(fā);六是分子機(jī)制驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),可用于Western blotting、Real-time PCR、流式細(xì)胞術(shù)等實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證淋巴瘤相關(guān)基因及信號(hào)通路的調(diào)控機(jī)制,為相關(guān)研究提供分子層面的數(shù)據(jù)支撐。該細(xì)胞適配科研院所、生物醫(yī)藥企業(yè)、高校實(shí)驗(yàn)室及各級(jí)醫(yī)院腫瘤科、血液科科研部門,助力相關(guān)科研實(shí)驗(yàn)的順利開展。
備注:(具體細(xì)胞分離、培養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)操作方法請(qǐng)參考產(chǎn)品說(shuō)明書)
儲(chǔ)存與注意事項(xiàng)
儲(chǔ)存方面,該細(xì)胞凍存狀態(tài)下需置于-80℃超低溫冰箱或液氮中保存,有效期為12個(gè)月,凍存時(shí)需使用含5-10%DMSO的配套凍存液,采用梯度降溫法凍存(-1~-2℃/min降溫至-25℃以下,再以-5~-10℃/min降溫至-100℃后浸入液氮),避免細(xì)胞損傷;復(fù)蘇時(shí)需快速解凍(37℃水浴1-2分鐘),解凍后立即用70%酒精消毒凍存管,避免進(jìn)水污染,復(fù)蘇后需立即接種至培養(yǎng)瓶,加入預(yù)熱的專用培養(yǎng)基,置于37℃、5% CO?、飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),復(fù)蘇后24小時(shí)內(nèi)避免離心或劇烈晃動(dòng),確保細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境、恢復(fù)活力;常規(guī)培養(yǎng)狀態(tài)下,細(xì)胞需置于37℃、5% CO?培養(yǎng)箱中,使用含10%-15%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)基培養(yǎng),定期更換培養(yǎng)基(每1-2天一次),維持細(xì)胞密度在1×10?-1×10? cells/mL,避免細(xì)胞密度過(guò)低或過(guò)高導(dǎo)致生長(zhǎng)異常。注意事項(xiàng)包括:產(chǎn)品僅供科研使用,不用于臨床治療診斷;細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)需快速解凍,避免反復(fù)凍融,解凍后及時(shí)接種,防止細(xì)胞活力下降,凍存管取出時(shí)需注意防護(hù),避免凍傷;培養(yǎng)過(guò)程中需嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作原則,禁止共用培養(yǎng)耗材,避免細(xì)胞污染,若發(fā)生污染切勿進(jìn)行半量換液;細(xì)胞傳代時(shí)需輕輕吹打培養(yǎng)瓶,避免劇烈震蕩損傷細(xì)胞,傳代比例建議為1:2-1:3,確保細(xì)胞生長(zhǎng)密度適宜;檢測(cè)過(guò)程中(如Western blotting、流式細(xì)胞術(shù)),需嚴(yán)格遵循實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范,確保c-Myc基因表達(dá)及相關(guān)分子檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確;過(guò)期細(xì)胞及污染細(xì)胞嚴(yán)禁使用,詳細(xì)安全信息請(qǐng)參照產(chǎn)品SDS文件;運(yùn)輸過(guò)程中需采用干冰運(yùn)輸,避免高溫、劇烈震蕩,確保細(xì)胞活力,運(yùn)輸后需及時(shí)復(fù)蘇或轉(zhuǎn)移至對(duì)應(yīng)儲(chǔ)存環(huán)境。
訂購(gòu)信息
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以上信息僅供參考,具體請(qǐng)已產(chǎn)品說(shuō)明書為準(zhǔn)。