EB病毒轉化的人B淋巴細胞
EB病毒轉化的人B淋巴細胞,是通過EB病毒(Epstein-Barr Virus,EBV)特異性感染人外周血B淋巴細胞,誘導其發生永生化轉化形成的淋巴母細胞系,是科研領域常用的標準化實驗材料。該細胞系核心優勢在于可在體外長期穩定培養,同時完整保留人B淋巴細胞的部分免疫表型與生物學功能,攜帶EBV基因組并可長期潛伏表達相關抗原,生物安全等級為BSL-2。該細胞系經嚴格質量鑒定,無細菌、真菌、支原體及無關病毒污染,細胞活力高、代次低,生物學特性穩定,可廣泛應用于人類遺傳學、免疫學、病毒學、腫瘤學等多個科研領域,為相關實驗研究提供可靠的體外細胞模型支撐,適配科研院所、生物醫藥企業及各級醫院科研部門的實驗需求。
檢測原理
本產品的核心檢測是EBV感染有效性驗證、細胞純度及活性鑒定,結合細胞生物學與分子生物學檢測方法,確保細胞系的真實性與穩定性,具體原理如下:一是EBV感染驗證,采用免疫熒光法或Western Blot法,檢測細胞內EBV相關抗原(如EBNA、VCA)的表達,或通過PCR技術檢測EBV基因組特異性片段,確認細胞已成功被EBV感染并實現永生化;二是細胞活性檢測,采用臺盼藍染色法,利用活細胞細胞膜完整、不被臺盼藍染色,死細胞細胞膜破損、被染成藍色的特性,計數活細胞比例,評估細胞活性;三是細胞純度檢測,通過流式細胞術檢測細胞表面CD21(EBV受體)、CD19(B淋巴細胞特異性標志物)的表達,排除雜細胞污染,確保細胞系純度;四是污染檢測,采用微生物培養法檢測細菌、真菌污染,PCR法檢測支原體污染,確保細胞無外源污染,保障實驗數據的可靠性。
產品特點
本產品針對科研實驗需求優化制備,兼具穩定性、特異性與實用性,核心特點如下:1. 永生化特性突出,可在體外長期穩定培養,倍增時間約2-3天,無需頻繁分離原代人B淋巴細胞,大幅降低實驗人力與時間成本,同時避免原代細胞來源有限的問題;2. 生物學特性穩定,經多代傳代后仍能保留人B淋巴細胞部分免疫功能及EBV潛伏感染狀態,染色體核型保持人類正常二倍體,無明顯變異,保障實驗數據的一致性;3. 特異性強,僅由EBV感染人B淋巴細胞轉化形成,可特異性表達EBV相關抗原,部分細胞系可釋放高滴度EBV,適配EBV相關專項研究及人EBV感染機制研究;4. 細胞活力高,產品出廠前經嚴格篩選,細胞活力≥95%,代次控制在5代以內,復蘇后存活率高,可快速適應培養環境;5. 無外源污染,經嚴格QC檢測,確保無細菌、真菌、支原體及無關病毒污染,提供完整檢測報告;6. 適配性廣,可兼容RPMI 1640、IMDM等多種培養基,支持懸浮培養,部分細胞可適應缺氧培養條件,適配免疫、病毒、遺傳等多種科研實驗場景;7. 實用性強,可直接用于實驗,無需額外進行轉化操作,廠家提供全程技術指導,降低實驗門檻。
適用樣本類型
本產品為細胞成品,適配各類科研實驗場景,可直接用于相關實驗操作,其對應的原代樣本來源及成品細胞適用的實驗樣本形式如下:原代樣本來源為健康人群外周血B淋巴細胞,經EBV轉化(轉化過程中加入環孢mei素A抑制T淋巴細胞,提升轉化效率)后形成成品細胞系,完整保留人B淋巴細胞相關生物學特性;成品細胞可直接作為實驗樣本,用于體外培養、藥物處理、分子檢測、免疫實驗等,適配的實驗樣本形式包括細胞懸液、細胞裂解液、細胞爬片等,可滿足EBV感染機制、B淋巴細胞免疫功能、藥物篩選等不同實驗檢測需求。
備注:(具體樣本處理方法請參考產品說明書)
儲存與注意事項
(一)儲存條件
1. 復蘇狀態細胞:收到細胞后,立即置于37℃、5%CO?恒溫培養箱中培養,24小時內完成換液,短期儲存(1-7天)可維持該培養條件,避免頻繁移動培養瓶;2. 凍存狀態細胞:采用液氮(-196℃)長期儲存,凍存液配方為30%基礎培養基+60%胎牛血清+10%DMSO,分裝至凍存管后經程序降溫(4℃→-20℃→-80℃→液氮)處理,避免反復凍融;3. 未開封配套試劑(如凍存液、復蘇輔助試劑):2-8℃冷藏避光保存,有效期內使用,嚴禁冷凍。
(二)注意事項
1. 本產品僅供科研使用,不可用于人類或動物臨床診斷、治療,非藥用、非食用,操作需在BSL-2生物安全實驗室進行,嚴格遵循無菌操作規范及血液制品處理預防措施;2. 細胞培養過程中,實驗器材需徹di滅菌,移液器吸頭一次性使用,避免交叉污染,不可擅自更換培養基體系或血清比例,定期觀察細胞狀態,及時換液、傳代,確保細胞生物學特性穩定;3. 收到細胞后需立即檢查,若出現培養瓶破損、漏液、培養液渾濁或細胞活力異常,及時與廠家聯系反饋;4. 細胞復蘇時需快速解凍(37℃水浴5-10分鐘),避免DMSO損傷細胞,復蘇后及時離心洗滌,培養過夜后檢查細胞狀態;5. 部分細胞系(如B95-8衍生系)可能攜帶松鼠猴逆轉錄病毒(SMRV-B95-8),操作時需加強防護,廢棄細胞及培養廢液按生物安全規范妥善處理;6. 定期對細胞進行鑒定,包括EBV感染狀態、細胞純度及污染情況,防止細胞變異或污染;7. 凍存細胞復蘇后建議盡快使用,未使用的細胞需按規范凍存,避免反復凍融影響細胞活性及生物學特性穩定性。
訂購信息
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以上信息僅供參考,具體請已產品說明書為準。