II型肺泡上皮細胞
II型肺泡上皮細胞(Type II Alveolar Epithelial Cells,AEC II),是來源于哺乳動物肺組織的肺泡上皮細胞亞群,為貼壁生長型細胞,是肺泡上皮的主要功能細胞之一,也是肺組織穩態維持、損傷修復及肺部疾病發生發展的核心細胞。該細胞核心功能是合成、分泌肺泡表面活性物質(PS),降低肺泡表面張力,防止肺泡塌陷,同時具備自我更新及分化為I型肺泡上皮細胞的能力,是肺損傷后肺泡修復的關鍵種子細胞。
檢測原理
該細胞的核心檢測是細胞特異性鑒定、活性檢測、純度檢測及無污染驗證,結合細胞生物學、免疫組織化學及分子生物學檢測方法,確保細胞系的真實性、功能性與穩定性,具體原理如下:一是細胞特異性鑒定,采用免疫細胞化學(ICC)或Western Blot法,檢測細胞特異性標志物(如表面活性蛋白SP-A、SP-B、SP-C、SP-D及細胞角蛋白CK7)的表達,確認細胞身份,排除其他肺組織細胞(如I型肺泡上皮細胞、成纖維細胞)污染;二是細胞活性檢測,采用臺盼藍染色法,利用活細胞細胞膜完整、不被臺盼藍染色,死細胞細胞膜破損、被染成藍色的特性,計數活細胞比例,評估細胞活性;三是細胞純度檢測,通過流式細胞術檢測SP-A、SP-C等特異性標志物的陽性表達率,確保細胞純度≥95%,排除雜細胞污染;四是污染檢測,采用微生物培養法檢測細菌、真菌污染,PCR法檢測支原體污染,確保細胞無外源污染,保障實驗數據的可靠性;五是功能驗證,檢測細胞分泌肺泡表面活性物質的能力,通過油紅O染色觀察細胞內脂滴(表面活性物質儲存場所),確認細胞具備正常生理功能。
產品特點
本產品針對肺部相關科研實驗需求優化制備,兼具特異性、功能性與實用性,核心特點如下:1. 功能特性完整,完整保留體內該細胞的核心功能,可正常合成、分泌肺泡表面活性物質,具備自我更新及向I型肺泡上皮細胞分化的潛能,適配肺部損傷修復相關研究;2. 特異性強,高表達SP-A、SP-B、SP-C、SP-D等該細胞特異性標志物,細胞純度高,無其他肺組織雜細胞污染,可特異性用于肺部疾病機制研究;3. 生物學特性穩定,原代細胞可體外短期穩定培養,永生化細胞可長期傳代培養,經多代傳代后仍能保留其典型生理功能及標志物表達,染色體核型穩定(永生化細胞),無明顯變異,保障實驗數據的一致性;4. 細胞活力高,產品出廠前經嚴格篩選,原代細胞活力≥90%,永生化細胞活力≥95%,代次控制在適宜范圍,復蘇后存活率高,可快速適應體外培養環境;5. 無外源污染,經嚴格QC檢測,確保無細菌、真菌、支原體及無關病毒污染,提供完整檢測報告,包含細胞特異性鑒定及功能驗證數據;6. 適配性廣,可兼容DMEM/F12、RPMI 1640等多種培養基,支持貼壁培養,適配肺部疾病機制、藥物毒理學、肺泡表面活性物質代謝、肺損傷修復等多種科研實驗場景;7. 實用性強,可直接用于實驗,無需額外進行細胞分離純化操作,廠家提供全程技術指導,包括細胞復蘇、培養、傳代及功能檢測相關操作,降低實驗門檻;8. 來源可靠,細胞均源自健康哺乳動物肺組織(可按需提供人源、鼠源等不同來源),分離培養流程標準化,確保細胞質量均一。
適用樣本類型
本產品為細胞成品(原代或永生化),適配各類肺部相關科研實驗場景,可直接用于相關實驗操作,其對應的原代樣本來源及成品細胞適用的實驗樣本形式如下:原代樣本來源為健康哺乳動物(人、小鼠、大鼠等)肺組織,經yi酶消化、梯度離心等方法分離純化后,培養獲得原代細胞;永生化細胞由原代細胞經基因改造(如SV40病毒轉化)獲得,可長期傳代。成品細胞可直接作為實驗樣本,用于體外培養、藥物處理、分子檢測、免疫實驗、細胞分化誘導、肺損傷模型構建等,適配的實驗樣本形式包括細胞懸液、細胞裂解液、細胞爬片、細胞涂片等,可滿足肺部疾病機制研究、藥物篩選、肺泡表面活性物質代謝研究、肺損傷修復機制研究等不同實驗檢測需求。
備注:(具體樣本處理方法請參考產品說明書)
儲存與注意事項
(一)儲存條件
1. 復蘇狀態細胞:收到細胞后,立即置于37℃、5%CO?恒溫培養箱中靜置2-3小時,待細胞貼壁后更換新鮮培養基,短期儲存(1-7天)可維持該培養條件,避免頻繁移動培養瓶,避免溫度波動影響細胞貼壁及活性;2. 凍存狀態細胞:采用液氮(-196℃)長期儲存,凍存液配方為30%基礎培養基(DMEM/F12優先)+60%胎牛血清+10%DMSO,分裝至凍存管后經程序降溫(4℃30分鐘→-20℃1小時→-80℃過夜→液氮)處理,避免反復凍融,凍存液可添加適量細胞保護劑,提升細胞復蘇存活率;3. 未開封配套試劑(如凍存液、復蘇輔助試劑、專用培養基):2-8℃冷藏避光保存,有效期內使用,嚴禁冷凍,專用培養基建議現配現用。
(二)注意事項
1. 本產品僅供科研使用,不可用于人類或動物臨床診斷、治療,非藥用、非食用,操作需在BSL-2生物安全實驗室進行,嚴格遵循無菌操作規范及細胞培養相關預防措施,避免細胞污染及實驗人員暴露風險;2. 細胞培養過程中,實驗器材需徹di滅菌,移液器吸頭一次性使用,避免交叉污染,建議使用專用培養基及血清,不可擅自更換培養基體系或血清比例,定期觀察細胞貼壁情況、形態及生長狀態,及時換液、傳代,避免細胞過度密集影響活性及功能;3. 收到細胞后需立即檢查,若出現培養瓶破損、漏液、培養液渾濁、細胞脫落嚴重或細胞活力異常,及時與廠家聯系反饋;4. 細胞復蘇時需快速解凍(37℃水浴5-8分鐘,輕輕搖晃凍存管至wan全融化),避免DMSO損傷細胞,復蘇后及時離心洗滌(1000rpm,5分鐘),去除凍存液后接種培養,培養過夜后檢查細胞貼壁及活性;5. 該細胞為貼壁細胞,傳代時需用yi酶消化(消化時間控制在1-2分鐘,避免過度消化),消化后及時終止,輕柔吹打細胞,避免機械損傷影響細胞功能;6. 定期對細胞進行鑒定,包括特異性標志物表達、細胞純度、污染情況及功能驗證(表面活性物質分泌),防止細胞變異、污染或功能丟失;7. 凍存細胞復蘇后建議盡快使用,未使用的細胞需按規范凍存,避免反復凍融影響細胞活性及生物學功能,原代細胞不建議長期傳代,建議在3-5代內完成實驗。
訂購信息
如需獲取產品詳細資料、批次質檢報告或報價方案,歡迎聯系上海拜力生物科技有限公司獲取技術支持與商務服務。
以上信息僅供參考,具體請已產品說明書為準。