RAG小鼠腎腺癌細胞
RAG小鼠腎腺癌細胞是基于酶聯免疫吸附法(ELISA)原理研發的體外診斷/科研檢測試劑盒,可特異性檢測該細胞培養樣本中腎癌相關標志物、增殖相關因子、凋亡相關蛋白及ERK信號通路相關分子的含量,也可用于該細胞培養過程中增殖活性監測、凋亡狀態評估及藥物作用效果檢測,經特異性驗證、靈敏度測試及重復性實驗確認,無交叉反應,檢測結果準確可靠,無試劑降解、雜菌污染等問題。該細胞是起源于RAG小鼠腎臟腺上皮細胞的惡性腫瘤細胞株,屬于腎細胞癌范疇,核心特性是增殖速度快、侵襲性強,可模擬體內腎腺癌的生長、轉移及侵襲特性,其生長狀態與腎癌標志物(如MAGI3、CEA等)表達、增殖因子分泌及ERK信號通路激活密切相關,廣泛應用于腎腺癌發病機制研究、抗腫瘤藥物篩選、腎癌靶向治療研發等領域,是評估腎腺癌細胞增殖、凋亡及藥物抑瘤效果的重要研究模型,可用于驗證舒尼替尼等靶向藥物對腎腺癌細胞的抑制作用研究。本試劑盒核心特征是特異性強、操作便捷、檢測快速,可精準定量相關指標含量,廣泛應用于腫瘤學科研、泌尿外科學研、藥物研發、細胞生物學實驗等領域,是臨床、科研領域的核心腎腺癌細胞相關檢測工具。
檢測原理
本試劑盒的核心檢測原理,基于酶聯免疫吸附法(ELISA),聚焦該細胞相關檢測指標(腎癌標志物、增殖因子、凋亡蛋白、ERK信號通路相關分子等)的抗原抗體特異性結合特性,結合腎腺癌細胞檢測的精準需求設計:試劑盒預先將目標檢測指標(如MAGI3、增殖相關因子、凋亡相關蛋白)特異性抗體包被于酶標板上,加入待檢測樣本(該細胞培養上清、細胞裂解液等)后,樣本中的目標指標會與酶標板上的抗體特異性結合,形成抗原-抗體復合物;洗滌去除未結合的雜蛋白、腎腺癌細胞碎片、無關細胞因子及其他泌尿系統相關蛋白后,加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的二抗,與復合物特異性結合,形成“包被抗體-目標指標-酶標二抗"的三明治結構;再加入底物液(TMB),HRP催化底物發生顯色反應,顯色強度與樣本中目標指標的含量呈正相關,通過酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),對照標準曲線即可計算出樣本中目標指標的具體含量。檢測流程規范:樣本采集后需及時處理(RAG腎腺癌細胞培養上清離心分離、細胞裂解液制備),按照試劑盒說明書稀釋樣本;酶標板平衡至室溫后,依次加入標準品、樣本及空白對照,37℃孵育30分鐘;洗滌3-5次后加入酶標二抗,37℃孵育20分鐘;再次洗滌后加入底物液,37℃避光孵育15分鐘;加入終止液終止反應,10分鐘內用酶標儀測定OD值,計算檢測結果。
產品特點
本產品針對該細胞相關指標檢測需求優化制備,核心特點如下:1. 特異性強:采用高特異性目標指標(腎癌標志物MAGI3、CEA、增殖因子等)單克隆抗體,可特異性結合樣本中的目標分子,不與正常RAG小鼠腎上皮細胞蛋白、其他腫瘤細胞因子及雜蛋白發生交叉反應,檢測特異性>99%,確保檢測結果精準,有效規避腎腺癌細胞相關檢測中的干擾因素,同時可有效區分腫瘤標志物假陽性與真實表達水平;2. 質控嚴格:每批次試劑盒均通過靈敏度、重復性、特異性及穩定性檢測,附完整QC報告,確保批內變異系數(CV)<8%、批間變異系數(CV)<10%,檢測靈敏度可達0.1ng/mL,符合科研標準,可精準監測RAG腎腺癌細胞培養過程中相關指標的微量變化,助力藥物抑瘤效果及ERK信號通路調控效果評估;3. 操作便捷:試劑盒含全套檢測試劑(包被酶標板、標準品、酶標二抗、底物液、終止液、洗滌液等),無需額外配制核心試劑,步驟簡單,全程可在2.5小時內完成,適配常規細胞生物學實驗室操作,新手易上手;4. 樣本兼容廣:可適配該細胞培養上清、細胞裂解液、RAG細胞接種后小鼠血清/腎組織勻漿等核心樣本類型,樣本用量少(僅需50μL/孔),無需復雜預處理,僅需簡單離心、稀釋即可檢測,適配RAG腎腺癌細胞培養、藥物篩選、腎癌發病機制研究等多場景樣本;5. 適配場景廣:可用于該細胞增殖活性監測、凋亡狀態評估、腎癌標志物及ERK信號通路相關分子表達檢測,腎腺癌發病機制(如MAGI3/ERK信號通路)研究,抗腫瘤藥物(hua療藥、靶向藥、免疫調節劑)的篩選與效果評估,以及腫瘤學科研、泌尿外科學研、藥物研發實驗室的常規檢測。
適用樣本類型
本試劑盒適配該細胞相關樣本的體外檢測與科研實驗,適用樣本類型明確:該細胞培養上清樣本(對數期RAG腎腺癌細胞培養上清,離心去除細胞碎片)、RAG細胞裂解液樣本(無菌收集RAG腎腺癌細胞后裂解,離心取上清)、RAG細胞接種后小鼠血清樣本(靜脈采血,離心分離,避免溶血)、RAG細胞接種后小鼠腎組織勻漿樣本(腎腫瘤組織破碎后離心取上清);實驗場景涵蓋該細胞增殖、凋亡監測,腎癌標志物及ERK信號通路相關分子表達檢測,腎腺癌發病機制研究,抗腫瘤藥物篩選與效果評估,以及相關實驗室的常規檢測。推薦檢測體系:使用試劑盒配套酶標板,酶標儀(波長450nm),按照說明書步驟操作;樣本稀釋比例為1:10(細胞裂解液、腎組織勻漿可根據濃度適當調整),標準品濃度梯度為0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6ng/mL,參考區間為0.2~1.3ng/mL(具體以說明書為準)。(具體樣本處理方法請參考產品說明書,RAG腎腺癌細胞為貼壁細胞,培養需遵循貼壁細胞培養規范,接種密度不低于50萬個/mL,復蘇后需給予一定恢復期,定期觀察細胞形態、增殖狀態及侵襲能力,避免密度過低導致不增殖,體外培養需注意維持細胞貼壁狀態,避免脫落影響檢測結果)
儲存與注意事項
1. 試劑盒需全程2-8℃避光冷藏儲存,嚴禁-20℃冷凍或常溫放置,避免溫度波動導致試劑降解、抗體活性喪失;2. 標準品、酶標二抗等試劑開封后,密封冷藏保存,1個月內用完,目標指標標準品避免反復凍融,防止其蛋白結構破壞,底物液需避光保存;3. 樣本采集后及時處理,RAG腎腺癌細胞培養上清、細胞裂解液冷藏24小時內完成檢測,小鼠血清、腎組織勻漿冷藏或-20℃短期保存,48小時內完成檢測,避免樣本變質、目標指標降解,RAG細胞樣本需新鮮采集,避免細胞活力下降、侵襲能力異常影響檢測結果;4. 操作時嚴格遵循無菌規范,佩戴防護用品,避免試劑、樣本接觸皮膚黏膜;檢測過程中控制孵育溫度與時間,洗滌充分,避免未結合試劑殘留導致結果偏差;5. 底物液具有潛在刺激性,終止液為酸性溶液,操作時需謹慎,避免接觸衣物與皮膚,檢測完成后按生物安全規范處理廢棄試劑與酶標板;6. 該細胞樣本需無菌采集與處理,細胞裂解液需充分裂解RAG腎腺癌細胞,離心去除細胞碎片及雜質后再進行檢測,避免雜質干擾檢測結果;培養上清需在RAG細胞對數期采集,避免細胞凋亡釋放的蛋白酶導致目標指標降解,同時避免培養體系中血清濃度過高影響檢測準確性,藥物干預實驗中需避免藥物本身干擾檢測結果。
訂購信息
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以上信息僅供參考,具體請已產品說明書為準。