鵪鶉纖維肉瘤細胞
鵪鶉纖維肉瘤細胞（Quail Fibrosarcoma Cell Kit），是基于酶聯免疫吸附法（ELISA）原理研發的科研專用檢測試劑盒，可特異性檢測相關細胞培養樣本中核心標志物、增殖凋亡相關蛋白、信號通路分子及病毒感染相關因子的含量，也可用于該細胞培養過程中增殖活性監測、腫瘤特性鑒定、藥物干預效果評估及病毒敏感性檢測，經特異性驗證、靈敏度測試及重復性實驗確認，無交叉反應，檢測結果準確可靠，無試劑降解、雜菌污染等問題。該細胞以經典QT6細胞系為代表，由甲基膽蒽誘導的日本鵪鶉纖維肉瘤衍生，呈貼壁梭形生長，具有致瘤性，對禽肉瘤病毒、馬立克氏病病毒等多種病毒敏感，核心免疫表型為波形蛋白（Vimentin）強陽性，結蛋白（Desmin）、S-100等陰性，廣泛應用于禽類腫瘤發病機制、病毒學研究、抗腫瘤及抗病du藥物篩選等領域，是評估該細胞功能、腫瘤特性及藥物/疫苗干預效果的重要研究模型，可用于驗證抗腫瘤藥物對腫瘤細胞增殖的抑制作用及疫苗免疫原性相關研究。本試劑盒核心特征是特異性強、操作便捷、檢測快速，可精準定量相關指標含量，廣泛應用于禽類腫瘤科研、細胞生物學實驗、藥物研發及疫苗候選物評估等領域，是科研領域的核心相關檢測工具。
檢測原理
本試劑盒的核心檢測原理，基于酶聯免疫吸附法（ELISA），聚焦相關細胞檢測指標（核心標志物、增殖凋亡蛋白、信號通路分子、病毒感染相關因子等）的抗原抗體特異性結合特性，結合該細胞功能檢測的精準需求設計：試劑盒預先將目標檢測指標（如Vimentin、Ki-67、PDGFR-β、病毒囊膜蛋白等）特異性抗體包被于酶標板上，加入待檢測樣本（相關細胞培養上清、細胞裂解液等）后，樣本中的目標指標會與酶標板上的抗體特異性結合，形成抗原-抗體復合物；洗滌去除未結合的雜蛋白、細胞碎片、無關細胞因子及其他禽類組織相關蛋白后，加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的二抗，與復合物特異性結合，形成“包被抗體-目標指標-酶標二抗"的三明治結構；再加入底物液（TMB），HRP催化底物發生顯色反應，顯色強度與樣本中目標指標的含量呈正相關，通過酶標儀在450nm主波長（參比波長630nm）下測定吸光度（OD值），對照標準曲線即可計算出樣本中目標指標的具體含量。檢測流程規范：樣本采集后需及時處理（相關細胞培養上清離心分離、細胞裂解液制備），按照試劑盒說明書稀釋樣本；酶標板平衡至室溫后，依次加入標準品、樣本及空白對照，37℃孵育30分鐘；洗滌5次后加入酶標二抗，37℃孵育20分鐘；再次洗滌5次后加入底物液，37℃避光孵育15分鐘；加入終止液終止反應，10分鐘內用酶標儀測定OD值，計算檢測結果，全程約2.5小時。
產品特點
本產品針對相關細胞指標檢測需求優化制備，核心特點如下：
1. 特異性優異：采用針對禽類Vimentin、PDGFR-β等靶點的高特異性單克隆抗體，與鵪鶉正常成纖維細胞、其他禽類腫瘤細胞系的雜蛋白無交叉反應，檢測特異性＞99%，確保檢測結果精準，有效規避相關檢測中的干擾因素，同時可有效區分腫瘤特異性標志物的假陽性與真實表達水平；
2. 質控嚴格：每批次試劑盒均通過靈敏度、重復性、特異性及穩定性檢測，附完整QC報告，確保批內變異系數（CV）＜8%、批間變異系數（CV）＜10%，檢測靈敏度可達0.08ng/mL，符合科研標準，可精準監測相關細胞培養過程中相關指標的微量變化，助力藥物/疫苗干預效果及腫瘤特性評估；
3. 操作便捷：試劑盒含全套預配試劑（包被酶標板、標準品、酶標二抗、底物液、終止液、濃縮洗滌液等），無需額外配制核心試劑，步驟簡化，全程可在2.5小時內完成，適配常規細胞生物學實驗室操作，新手易上手；
4. 樣本兼容廣：可適配相關細胞培養上清、細胞裂解液、荷瘤鵪鶉血清/腫瘤組織勻漿等核心樣本類型，樣本用量少（僅需50μL/孔），無需復雜預處理，僅需簡單離心、稀釋即可檢測，適配細胞培養、病毒培養、藥物篩選、腫瘤學研究等多場景樣本；
5. 適配場景廣：可用于相關細胞增殖活性監測、腫瘤特性鑒定、信號通路（PDGFR-β）研究、抗腫瘤藥物篩選、病毒感染效率評估及疫苗研發效果檢測，適配禽類腫瘤學、病毒學、藥物研發等多領域科研需求。
適用樣本類型
本試劑盒適配相關細胞樣本的體外科研檢測，適用樣本類型明確及處理要求如下：相關細胞培養上清樣本（對數期細胞上清，12000rpm離心5分鐘，去除細胞碎片，適用于分泌型因子、病毒相關指標檢測）；細胞裂解液樣本（無菌收集細胞，用RIPA裂解液（含蛋白酶抑制劑）裂解，離心取上清，適用于細胞內標志物、信號通路分子檢測）；荷瘤鵪鶉血清樣本（靜脈采血，室溫靜置后離心，避免溶血，4℃短期保存，適用于體內腫瘤負荷、藥物代謝相關檢測）；腫瘤組織勻漿樣本（取新鮮腫瘤組織，研磨后用PBS勻漿，離心取上清，適用于體內腫瘤標志物表達分析）。推薦檢測體系：使用試劑盒配套酶標板，酶標儀需具備450nm/630nm雙波長功能；樣本稀釋比例為培養上清1:5、細胞裂解液1:10、組織勻漿1:8（可根據實際濃度調整），標準品濃度梯度為0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6ng/mL，參考區間以說明書為準。（具體樣本處理方法請參考產品說明書，該細胞為貼壁梭形細胞，培養需遵循貼壁細胞培養規范，推薦使用Ham's F12K（含2mM L-谷an酰胺、1.5g/L碳suan氫鈉）添加10%胰蛋白胨磷酸鹽肉湯、5%小牛血清，或Ham's F10添加10%胎牛血清；培養條件為37℃、5%CO?，傳代比例1:2~1:4，75%匯合度時傳代，可通過機械吹打或低濃度yi酶（含PVP）消化，避免細胞聚團；凍存液建議為95%培養液+5%DMSO，液氮保存，傳代代次控制在低代次以維持腫瘤特性與病毒敏感性）
儲存與注意事項
1. 試劑盒需全程2-8℃避光冷藏儲存，嚴禁-20℃冷凍或常溫放置，避免溫度波動導致試劑降解、抗體活性喪失；
2. 標準品、酶標二抗等試劑開封后，密封冷藏保存，1個月內用完，目標指標標準品避免反復凍融，防止其蛋白結構破壞，底物液需避光保存；
3. 樣本采集后及時處理，相關細胞培養上清、細胞裂解液冷藏24小時內完成檢測，禽類血清、腫瘤組織勻漿冷藏或-20℃短期保存，48小時內完成檢測，避免樣本變質、目標指標降解，細胞樣本需新鮮采集，避免細胞活力下降、貼壁能力異常及病毒敏感性降低影響檢測結果；
4. 操作時嚴格遵循無菌規范，佩戴防護用品，避免試劑、樣本接觸皮膚黏膜；檢測過程中控制孵育溫度與時間，洗滌充分，避免未結合試劑殘留導致結果偏差；
5. 底物液具有潛在刺激性，終止液為酸性溶液，操作時需謹慎，避免接觸衣物與皮膚，檢測完成后按生物安全規范處理廢棄試劑與酶標板；
6. 相關細胞樣本需無菌采集與處理，細胞裂解液需充分裂解細胞，離心去除細胞碎片及雜質后再進行檢測，避免雜質干擾檢測結果；培養上清需在細胞對數期采集，避免細胞凋亡釋放的蛋白酶導致目標指標降解，同時避免培養體系中血清濃度過高影響檢測準確性，藥物干預實驗及病毒感染實驗中需設置空白對照與陰性對照，排除藥物、病毒本身對顯色反應的干擾，病毒感染檢測中需注意樣本采集時機以捕捉病毒增殖峰值。
訂購信息
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以上信息僅供參考，具體請已產品說明書為準。
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